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人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒

更新時(shí)間0:2024-12-18 信息編號(hào):f517ol55fde374 舉報(bào)維權(quán)
人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒
人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒
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人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒
供應(yīng)商 上海篤瑪生物科技有限公司 店鋪
認(rèn)證
報(bào)價(jià) 人民幣 2400.00元每盒
關(guān)鍵詞 可定制,人ELISA試劑盒,酶聯(lián)試劑盒,90分鐘一步法
所在地 上海市寶山區(qū)河曲路118號(hào)6981室

產(chǎn)品詳細(xì)介紹


人神經(jīng)特烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒



要求



做好對(duì)照



正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特反應(yīng),可采用羊、兔或BSA等封閉。



實(shí)驗(yàn)條件的選擇



ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:



(1) 固相載體的選擇:許多可作為固相載體,如聚氯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。常用的是40孔聚凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。



(2) 包被(或抗原)的選擇:將(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。



(3) 酶標(biāo)記工作濃度的選擇:用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。



(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMBABTS是較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。



進(jìn)口分裝:



檢測(cè)范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。



試劑盒的曲線



試劑盒的曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。



試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。



試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測(cè),避免分次檢測(cè)可能造成試劑量不足的情況。



檢測(cè)及酶結(jié)合物的稀釋度(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。



白介素6是一種細(xì)胞因子,已被證實(shí)為B細(xì)胞分化因子.它是一種形成,它的特性,如肝細(xì)胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的等,也備受關(guān)注. 并且已證實(shí)白介素-6病理學(xué)存在的相關(guān)關(guān)系.例如,報(bào)道多種的生長(zhǎng)因子為白介素-6, 瘤細(xì)胞能合成白介素-6并表達(dá)白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性和自身發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測(cè)小鼠細(xì)胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運(yùn)用了兩種,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強(qiáng)度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測(cè)范圍 10.94的 700 pg/mL 預(yù)期用途






ELISA法是診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、病及非傳染病等方面的診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測(cè)定,而且也可用于測(cè)定中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,






ELISA的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或仍保持其學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或既保留其學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復(fù)合物與中的其他分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定達(dá)到很高的度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定。



 



操作:




雙夾心法



1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。



2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。



3. 加酶標(biāo):于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。



4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。



5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M0.05ml。



6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。



間接法



1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;



2.次日洗滌3次;



3.加一定稀釋的待檢樣品(未知)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;



4.(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二)0.1ml;



5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;



6.一遍用DDW洗滌。



其余步驟同“雙夾心法”的4、5、6。










所屬分類:化學(xué)助劑/試劑盒

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關(guān)于上海篤瑪生物科技有限公司

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主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA檢測(cè)試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑

上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的生物企業(yè)。 總部位于上海,并在全國(guó)設(shè)有經(jīng)銷或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠(chéng)信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,擁有的研發(fā)和質(zhì)量檢測(cè)團(tuán)隊(duì)以及的倉(cāng)儲(chǔ)和物流系統(tǒng)?!昂V瑪生物”已經(jīng)得到全國(guó)科研工作者的認(rèn)可,成為廣大經(jīng)銷商推崇的品牌。 公司擁有一批的研發(fā)人員,我們專注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣,品質(zhì)可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時(shí),提供各種常規(guī)生化試劑,庫存常備產(chǎn)品多達(dá)10000多種,可隨時(shí)為廣大科研工作者提供各類試劑。在質(zhì)量方面,謹(jǐn)記公司信念:質(zhì)量一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳a(chǎn)流程,科學(xué)的質(zhì)量檢測(cè)方法和成熟的質(zhì)量檢測(cè)程序,我們恪守對(duì)每一位用戶的承諾:用的態(tài)度做的品牌。同時(shí),公司組建了一支的技術(shù)服務(wù)隊(duì)伍,能夠?yàn)榭蒲泄ぷ髡咛峁┑募夹g(shù)服務(wù)。每一位購(gòu)買篤瑪生物產(chǎn)品的用戶都能夠得到的咨詢和完善的售后服務(wù)。

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