僅供研究使用

 豚鼠鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)ELISA試劑盒

酶聯(lián)吸附法（ELISA）是一種靈敏、特異的學技術(shù)，常用于醫(yī)學、生物領(lǐng)域中的抗原或檢測。其使用范圍包括：1.臨床診斷：ELISA可以用于檢測傳染?。ㄈ?、等）、標志物等，協(xié)助進行診斷。2.食品安全：ELISA可以用于檢測食品中的有害（如殘留、獸藥殘留等），保障食品安全。3.監(jiān)測：ELISA可以用于評估水質(zhì)、空氣等指標，監(jiān)測狀況。4.生物分子檢測：ELISA可以用于檢測生物分子，如蛋白質(zhì)、多肽、等，在生物醫(yī)學研究領(lǐng)域廣泛應(yīng)用?？傊?，酶聯(lián)吸附法在醫(yī)學、生物領(lǐng)域中具有廣泛的應(yīng)用價值，是臨床診斷和中重要的輔助手段。

酶聯(lián)吸附法（ELISA）是一種靈敏、特異的學技術(shù)，常用于醫(yī)學、生物領(lǐng)域中的抗原或檢測。其操作步驟如下：1.包被：將抗原或與酶結(jié)合，形成酶標抗原或，并固定在固相載體上。2.洗滌：去除未結(jié)合的和雜質(zhì)。3.封閉：加入封閉液，封閉固相載體上未結(jié)合的位點，以非特結(jié)合。4.洗滌：去除未結(jié)合的封閉液和雜質(zhì)。5.加樣：加入待檢測的樣本，使其與固相載體上的抗原或結(jié)合。6.洗滌：去除未結(jié)合的樣本和雜質(zhì)。7.加入酶標：使固相載體上的抗原或與酶標結(jié)合，將抗原或間接標記上酶。8.洗滌：去除未結(jié)合的酶標和雜質(zhì)。9.顯色：加入底物，使酶催化底物生成有色產(chǎn)物，根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進行抗原或的定性或定量檢測。需要注意的是，具體的操作步驟可能因?qū)嶒炘O(shè)計、試劑品牌等不同而有所差異。在進行ELISA實驗時，應(yīng)嚴格按照試劑盒說明書和實驗指導手冊進行操作，控制好實驗條件和操作步驟，以實驗結(jié)果的準確性和可靠性。

試劑盒操作步驟：

   實驗開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1.加樣：分別設(shè)空白孔、孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。 為實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的品溶液。

2.棄去，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記工作液 100μl（取1μl生物素標記加99μl生物素標記稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用小時內(nèi)配制），37℃,60分鐘。

3.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。

4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記工作液） 100μl，37℃，60分鐘。

5.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。

6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時可見品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了實驗結(jié)果的準確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。

豚鼠鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)ELISA試劑盒

ELISA試劑盒的操作步驟如下：1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml，酶標板中每孔加入50μl，室溫、4℃或37℃過夜包被。2.洗滌：棄包被液（拍干，再用無塵紙吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次（每孔均要加滿），每次3min~5min。3.封閉：每孔加封閉液（1%BSA）250μl，37℃封閉2h。4.洗滌：用1×PBST洗滌液洗板3次，每次3min~5min。5.結(jié)合一抗：用1×PBST緩沖液1∶1000稀釋被檢，每孔100μl，要設(shè)立陰性對照，37℃孵育1.5h。6.洗滌：同上。7.結(jié)合酶標二抗：每孔加1×PBST緩沖液1000倍稀釋的酶標二抗羊抗鼠IgG-HRP（稀釋倍數(shù)根據(jù)產(chǎn)品不同有所不同，可按說明書進行）50μl，37℃孵育1h.8.洗滌：同上。9.顯色：每孔加底物溶液（TMB）50μl，置室溫避光顯色10min。10.待顯色后，每孔加入50μl終止液（2mol/L H2SO4）終止反應(yīng)。使用酶標儀讀取450nm的OD值，以確定水平。以上步驟僅供參考，具體操作請根據(jù)實際情況和產(chǎn)品說明書進行。

標本的采集及保存：

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  ：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復凍融。
  

  
  


• 
  

  
  ：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復凍融。
  

  
  


• 
  

  
  細胞物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。)
  

  
  


• 
  

  
  標本的稀釋原則：通過文獻檢索的了解待測樣本的大致含量，確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至曲線的范圍內(nèi)，檢測的結(jié)果才是準確的。稀釋的中，應(yīng)做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
  

  
  


• 
  

  
  品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。 如配制150 pg/ml品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
  

  
  


• 
  

  
  生物素標記的稀釋原則：臨用前以生物素標記稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記加990μl生物素標記稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用小時內(nèi)配制。
  

  
  


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  辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用小時內(nèi)配制
  

  
  

注意事項：

1.當混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。

2.洗滌非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。

3.一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，建議使用排槍加樣。

4.請每次測定的同時做曲線，做復孔。

5.如標本中待測含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數(shù)。

6.在配制品、檢測溶液工作液時，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。

7.底物請避光保存。

8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

試劑盒性能

1．準確性：品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2．靈敏度檢測濃度小于10 pg/ml。

3．特：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4．重復性：批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%。

主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA檢測試劑盒,標準品,生化試劑

上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學試劑及試劑盒的生物企業(yè)。 總部位于上海，并在全國設(shè)有經(jīng)銷或代理機構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念，擁有的研發(fā)和質(zhì)量檢測團隊以及的倉儲和物流系統(tǒng)?！昂V瑪生物”已經(jīng)得到全國科研工作者的認可，成為廣大經(jīng)銷商推崇的品牌。 公司擁有一批的研發(fā)人員，我們專注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣，品質(zhì)可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學、細胞生物學、學、生物醫(yī)學等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時，提供各種常規(guī)生化試劑，庫存常備產(chǎn)品多達10000多種，可隨時為廣大科研工作者提供各類試劑。在質(zhì)量方面，謹記公司信念：質(zhì)量一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴謹?shù)纳a(chǎn)流程，科學的質(zhì)量檢測方法和成熟的質(zhì)量檢測程序，我們恪守對每一位用戶的承諾：用的態(tài)度做的品牌。同時，公司組建了一支的技術(shù)服務(wù)隊伍，能夠為科研工作者提供的技術(shù)服務(wù)。每一位購買篤瑪生物產(chǎn)品的用戶都能夠得到的咨詢和完善的售后服務(wù)。

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