兔脾源性內(nèi)皮祖細胞

基本屬性：

細胞名稱：兔脾源性內(nèi)皮祖細胞 

組織來源：脾臟

商品貨號：LZ-YX10457

種屬來源：兔

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介：

脾是重要的淋巴器官，有造血、濾血、清除衰老血細胞及參與反應(yīng)等功能。也是淋巴細胞遷移和接受抗原刺激后發(fā)生應(yīng)到、產(chǎn)生效應(yīng)分子的重要場所。內(nèi)皮祖細胞具有游走特性，能進一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細胞，缺乏成熟內(nèi)皮細胞的特征性表型，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)。其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。

培養(yǎng)基：原代內(nèi)皮祖細胞培養(yǎng)體系

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：不規(guī)則細胞，

傳代特性：根據(jù)細胞特性

消化液：0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

使用方法：

兔脾源性內(nèi)皮祖細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈不規(guī)則細胞，，在技術(shù)部標準操作流程下，根據(jù)細胞特性，建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

兔脾源性內(nèi)皮祖品牌3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。          

兔脾源性內(nèi)皮祖型號3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml完全培養(yǎng)基(補加1%FBS，促進貼壁)重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；

4)待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

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原代細胞試用的實驗類型：

上海前面我們了解了原代細胞獲取和培養(yǎng)過程中應(yīng)該注意的一些細節(jié)，這有助于我們培養(yǎng)我們的原代細胞。那么原代細胞培養(yǎng)好后，它可適用哪些研究呢？

原代細胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學(xué)研究等，還可應(yīng)用于當今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。在這些應(yīng)用中幾乎都涉及了幾個常見的且基礎(chǔ)的細胞實驗，如下：

一、細胞增殖檢測：

常見檢測方法：CCK8檢測法 ，MTT檢測法，Brdu檢測法，Edu檢測法，平板克隆形成

二、細胞周期檢測

常見檢測方法：流式檢測細胞周期，標記有絲分裂百分率法

三、細胞凋亡檢測

常見檢測方法：流式檢測細胞凋亡，線粒體膜電位，活性氧檢測，Hoechst染色，電鏡，TUNEL

四、細胞轉(zhuǎn)移能力檢測

常見檢測方法：細胞劃痕實驗，Transwell實驗，Invasion實驗